反相高效液相色谱和憎水相互作用色谱间的区别是什么?
在这两种色谱模式下,固定相要比移动相表现出更强的憎水性。反相色谱固定相的憎水性程度要更高于憎水相互作用色谱的固定相。反相洗脱是通过加入与水互混的溶剂来调节移动相的极性,比如,脂肪醇或乙腈。洗脱发生在等强度(调节组分浓度恒定)或者梯度条件下(调节组分浓度持续增加)。
憎水相互作用色谱填料表现出相对较弱的憎水特征,通过在移动相中降低盐浓度从而降低溶剂极性来诱导洗脱行为的发生。憎水相互作用色谱通常用于蛋白质分离,而蛋白质长时间暴露在有机溶剂内会诱发不可逆解构,从而导致生物活性丧失。
在实验室分析领域,尤其是在分离鉴定关联度非常高的物质,包括蛋白质,反相高效液相色谱的地位仍然不可动摇。
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